Anti hcv суммарные что это

В ответ на попадание в организм человека инородных частиц, таких, как вирусы, иммунная система вырабатывает иммуноглобулины — защитные антитела. Эти антитела выявляют специальным анализом методом ИФА, скрининговым исследованием, используемым для установления факта инфицирования человека вирусом гепатита С. Для гепатита С все антитела содержат аббревиатуру anti-HCV, что означает «против вируса гепатита С».

Антитела гепатита С бывают двух классов — G и M, что в анализах пишется, как IgG и IgM (Ig – immunoglobulin (иммуноглобулин) — это латинское название антител). Anti-HCV total (anti-НСV, анти-hcv) — суммарные антитела (классов IgG и IgM) к антигенам вируса гепатита C. Тест на определение этих маркеров проводится всем пациентам, когда хотят проверить, есть ли у них гепатит С. Anti-HCV присутствуют как при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 — 6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите. Anti-HCV total также встречаются у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел самостоятельно. У таких людей данный маркер может обнаруживаться в течение 4 — 8 и более лет после выздоровления. Поэтому положительный анализ на anti-HCV не является достаточным для того, чтобы установить диагноз. На фоне хронической инфекции суммарные антитела выявляются постоянно, а после успешного лечения сохраняются длительное время (прежде всего за счет anti-HCV core IgG, о них написано ниже), при этом их титры постепенно снижаются.«

Важно знать, что антитела к гепатиту С не защищают от развития HCV-инфекции и не обеспечивают надежного иммунитета против повторного инфицирования.

Спектр anti-НСV (core, NS3, NS4, NS5) — это специфические антитела к отдельным структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С. Их определяют для суждения о вирусной нагрузке, активности инфекции, риске хронизации, разграничении острого и хронического гепатита, степени поражения печени. Обнаружение антител к каждому из антигенов имеет самостоятельное диагностическое значение. Anti-HCV состоят их структурных (core) и неструктурных (NS3, NS4, NS5) белков (протеинов).

Anti-HCV core IgG —антитела класса G к ядерным (core) белкам HCV. Anti-HCV IgG появляются с 11-12 недели после инфицирования, поэтому для диагностики возможных «свежих» случаев инфицирования используют Anti-HCV total, которые появляются раньше. Anti-HCV IgG достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу с момента инфицирования и при хроническом течении болезни выявляются в крови пожизненно. При перенесенном гепатите С титр антител класса IgG постепенно снижается и может достигнуть неопределяемых величин через несколько лет после выздоровления.

Anti-HCV IgM —антитела класса IgM к антигенам вируса гепатита C. Anti-HCV IgM могут определяться в крови уже через 4-6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. После завершения острого процесса уровень IgM падает и может повышается вновь во время реактивации инфекции, поэтому принято считать, что эти антитела являются признаком острой инфекции или хронической с признаками реактивации. При остром гепатите С длительное обнаружение антител класса М, является фактором, прогнозирующим переход заболевания в хроническую форму. Считается, что обнаружение anti-HCV IgM может отражать уровень виремии и активность гепатита С, однако не всегда при реактивации ХВГС anti-HCV IgM выявляются. Также есть случаи, когда при хроническом гепатите С в отсутствии реактивации обнаруживаются anti-HCV IgM.

Неструктурные (NS3, NS4, NS5) белки.

NS3, NS4, NS5 относятся к неструктурным (NS — nonstructural) белкам. На самом деле, этих белков больше — NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, однако в большинстве клинико-диагностических лабораторий определяют антитела к белкам NS3, NS4 и NS5.

Anti-NS3 выявляются на самых ранних этапах сероконверсии. Высокие титры anti-NS3 характерны при остром гепатите С и могут являться самостоятельным диагностическим маркером острого процесса. При остром процессе высокая концентрация anti-NS3 обычно свидетельствует о значительной вирусной нагрузке, а длительное сохранение их в острой фазе связано с высоким риском хронизации инфекционного процесса.

Anti -NS4 и anti-NS5, как правило, появляются в более поздние сроки. При ХВГС определение anti-NS4 в высоких титрах может свидетельствовать о длительности инфекционного процесса и, по некоторым данным, имеет связь со степенью поражения печени. Выявление anti-NS5 в высоких титрах часто свидетельствует о присутствии вирусной РНК, а в острой стадии является предиктором хронизации инфекционного процесса. Снижение титров NS4 и NS5 в динамике может являться благоприятным признаком, указывающим на формирование клинико-биохимической ремиссии. Титры anti-NS5 могут отражать эффективность ПВТ, причем их повышенные значения характерны для лиц, не отвечающих на терапию. После выздоровления титры anti-NS4 и anti-NS5 снижаются с течением времени. Результаты одного из исследований показали, что почти у половины пациентов через 10 лет после успешного лечения интерферонами, anti-NS4 и anti-NS5 не определялись. В следующей таблице приведены наиболее вероятные варианты трактовки сочетания маркеров гепатита С.

anti-HCV IgM	anti-HCV core IgG	anti-HCV NS IgG	RNA HCV	Примечание	Трактовка результата
+	+	—	+	Наличие клинико-лабораторных признаков острого гепатита, нарастанием титров anti-HCV core IgG	Острый гепатит С.
+	+	+	+	Наличие клинико-лабораторных признаков хронического гепатита	Хронический гепатит С, фаза реактивации
—	+	+	—	Отсутствие клинико-лабораторных признаков заболевания (при наличии сопутствующей патологии — возможно незначительное повышение активности аминотрансфераз)	Хронический гепатит С, латентная фаза
—	+	-/+	—	Стойкое отсутствие клинико-лабораторных признаков заболевания, присутствие anti-HCV core IgG в титрах 1:80 и ниже, нормальные уровни трансаминаз (АЛТ, АСТ), возможно определение анти-HCV NS IgG в низких титрах с постепенным исчезновением этих антител в течение нескольких лет

Реконвалесцент (выздоровевший) острого гепатита С или латентная фаза хронического гепатита С

Однако, для постановки диагноза, не всегда достаточно иметь результаты серологических исследований. Необходимо наличие эпидемиологических данных, сведений о времени и обстоятельствах возможного заражения, наличие клинико-лабораторных признаков заболевания.

Гепатит С продолжает распространяться в мире, несмотря на предлагаемые меры профилактики. Особая опасность, связанная с переходом в цирроз и рак печени, заставляет разрабатывать новые способы диагностики на ранних стадиях заболевания.

Антитела к гепатиту С представляют возможность изучения вируса-антигена и его свойств. Они позволяют выявить носителя инфекции, отличить его от больного заразного человека. Диагностика на основе антител к гепатиту С считается наиболее достоверным методом.

Неутешительная статистика

Статистика ВОЗ показывает, что сегодня в мире насчитывается около 75 млн людей, зараженных вирусным гепатитом С, свыше 80% из них — трудоспособного возраста. Ежегодно заболевают 1,7 млн.

Численность инфицированных людей составляет население таких стран, как Германия или Франция. Другими словами, каждый год в мире появляется город-миллионник, сплошь населенный зараженными людьми.

Предположительно, в России число инфицированных 4–5 млн человек, к ним ежегодно добавляется около 58 тыс. Практически это означает, что почти 4% населения заражены вирусом. Многие инфицированные и уже больные не знают о своей болезни. Ведь гепатит С длительно протекает бессимптомно.

Диагноз чаще ставится случайно, в качестве находки во время профилактического обследования или иного заболевания. Например, болезнь обнаруживается в период подготовки к плановой операции, когда кровь в соответствии со стандартами проверяют на различные инфекции.

В итоге: из 4–5 млн вирусоносителей лишь 780 тысяч знают о своем диагнозе, а на учете у врача стоят 240 тысяч пациентов. Представьте себе ситуацию, когда заболевшая в период беременности мать, не зная о своем диагнозе, передает заболевание новорожденному малышу.

Аналогичная российская ситуация сохраняется в большинстве стран мира. Высоким уровнем диагностики (80–90%) отличаются Финляндия, Люксембург и Нидерланды.

Как образуются антитела к вирусу гепатита С?

Антитела формируются из белково-полисахаридных комплексов в ответ на внедрение в организм человека чужеродного микроорганизма. При гепатите С — это вирус с определенными свойствами. Он содержит собственную РНК (рибонуклеиновую кислоту), способен мутировать, размножаться в гепатоцитах печени и постепенно разрушать их.

Интересный момент: нельзя считать человека, у которого нашли антитела обязательно больным. Известны случаи, когда вирус внедряется в организм, но сильными иммунными клетками вытесняется без запуска цепи патологических реакций.

• во время переливания недостаточно стерильной крови и препаратов из нее;
• при процедуре гемодиализа;
• инъекциях многоразовыми шприцами (в том числе наркотиков);
• оперативном вмешательстве;
• стоматологических процедурах;
• при производстве маникюра, педикюра, татуажа, пирсинга.

Незащищенный секс рассматривается как повышенный риск заражения. Особое значение придается пути передачи вируса от беременной матери к плоду. Шанс составляет до 7% случаев. Обнаружено, что при выявлении антител к вирусу гепатита С и ВИЧ-инфицирования у женщины вероятность заражения ребенка составляет 20%.

Что нужно знать о течении и последствиях?

При гепатите С острая форма наблюдается крайне редко, в основном (до 70% случаев) течение заболевания сразу приобретает хронический характер. Среди симптомов следует отметить:

• повышенную слабость и усталость;
• чувство тяжести в подреберье справа;
• рост температуры тела;
• желтушность кожи и слизистых;
• тошноту;
• снижение аппетита.

Для этого типа вирусного гепатита характерно преобладание легких и безжелтушных форм. В некоторых случаях проявления заболевания очень скудные (бессимптомное течение в 50–75% случаев).

Последствиями гепатита С являются:

• печеночная недостаточность;
• развитие цирроза печени с необратимыми изменениями (у каждого пятого больного);
• выраженная портальная гипертензия;
• раковое перерождение в гепатоцеллюлярную карциному.

Существующие варианты терапии не всегда предоставляют способы как избавиться от вируса. Присоединение осложнений оставляет надежду только на пересадку печени донора.

Что значит для диагностики наличие у человека антител к гепатиту С?

Чтобы исключить ложноположительный результат анализа на фоне отсутствия жалоб и признаков болезни, необходимо повторить исследование крови. Такая ситуация возникает нечасто, в основном при проведении профилактических осмотров.

Серьезное внимание вызывает выявление положительного теста на антитела к гепатиту С при повторных анализах. Это указывает, что такие изменения могут быть вызваны только присутствием вируса в гепатоцитах печени, подтверждает инфицированность человека.

Для дополнительной диагностики назначают биохимический анализ крови с определением уровня трансаминаз (аланиновой и аспарагиновой), билирубина, белка и фракций, протромбина, холестерина, липопротеидов и триглицеридов, то есть всех видов обмена веществ, в которых участвует печень.

Определение в крови наличия РНК вируса гепатита С (HCV), другого генетического материала с помощью полимеразной цепной реакции. Полученная информация о нарушенной функции печеночных клеток и подтверждение присутствия РНК НСV в сочетании с симптоматикой придает уверенность в диагнозе вирусного гепатита С.

Генотипы вируса HCV

Изучение распространения вируса в разных странах позволило выделить 6 видов генотипа, они отличаются по структурной цепочке РНК:

• №1 — распространен наиболее широко (40–80% случаев заражения), причем различают дополнительно 1а — доминирующий в США и 1b — на западе Европы и в Южной Азии;
• №2 — встречается всюду, но реже (10–40%);
• №3 — типичен для полуострова Индостан, Австралии, Шотландии;
• №4 — поражает население Египта и Средней Азии;
• №5 — характерен для стран Южной Африки;
• №6 — локализован в Гонконге и Макао.

Разновидности антител к гепатиту С

Антитела к гепатиту С делятся на два основных вида иммуноглобулинов. IgM (иммуноглобулины «М», core IgM) — образуются на белок ядер вируса, начинают вырабатываться через месяц–полтора после заражения, обычно свидетельствуют об острой фазе или недавно начавшемся воспалении в печени. Снижение активности вируса и трансформация болезни в хроническую форму может сопровождаться исчезновением из крови этого вида антител.

IgG — образуются позже, указывают на то, что процесс перешел в хроническое и затяжное течение, представляют основной маркер, который используется для скрининга (массового исследования) с целью обнаружения зараженных лиц, появляются через 60–70 дней от момента инфицирования.

Максимума достигает через 5–6 месяцев. Показатель не говорит об активности процесса, может быть признаком как текущего заболевания, так сохраняться многие годы после лечения.

На практике легче и дешевле определить суммарные антитела к вирусу гепатита С (total Anti-HCV). Сумма антител представлена обоими классами маркеров (М+G). Через 3–6 недель накапливаются М-антитела, затем вырабатываются G. Они появляются в крови пациента через 30 дней после заражения и остаются пожизненно или до момента полного удаления инфекционного агента.

Приведенные виды относятся к структурируемым белковым комплексам. Более тонкий анализ — определение антител не к вирусу, а к его отдельным неструктурируемым белковым компонентам. Они кодируются иммунологами, как NS.

Каждый результат указывает на особенности заражения и «поведения» возбудителя. Проведение исследований значительно увеличивает стоимость диагностики, поэтому в государственных медицинских учреждениях не применяется.

Наиболее важными считаются:

• Anti-HCV core IgG — возникают спустя 3 месяца после заражения;
• Anti-NS3 — повышены при остром характере воспаления;
• Anti-NS4 — подчеркивают длительное течение болезни и степень разрушения печеночных клеток;
• Anti-NS5 — появляются при высокой вероятности хронического течения, указывают на присутствие вирусной РНК.

Наличие антител к неструктурируемым белкам NS3, NS4 и NS5 определяют по специальным показаниям, анализ не входит в стандарт обследования. Считается достаточным определение структурируемых иммуноглобулинов и суммарных антител.

Периоды обнаружения антител в крови

Различные сроки образования антител к вирусу гепатита С и его компонентам позволяют достаточно точно судить о времени инфицирования, стадии заболевания и риске возникновения осложнений. Эта сторона диагностики используется при назначении оптимального лечения и для установления круга контактных лиц.

Таблица указывает на возможные сроки формирования антител

Когда образуются после заражения	Вид антител
через месяц–полтора	Анти-HCV total (суммарные)
через 11–12 недель (3 месяца)	Anti-HCV core IgG
одновременно с IgM спустя 4–6 недель	Anti-NS3
позже всех	Anti-NS4 и Anti-NS5

Этапы и сравнительная характеристика методов выявления антител

Работа по выявлению антител HCV проходит в 2 этапа. На первом — выполняются скрининговые исследования в больших объемах. Используются методы, не отличающиеся высокой специфичностью. Положительный результат анализа означает, что необходимо провести дополнительные специфичные тесты.

На втором — в исследования включаются только пробы с ранее предполагаемым положительным или сомнительным значением. Истинным положительным результатом считаются те анализы, которые подтверждены высокочувствительными и специфичными способами.

Сомнительные итоговые пробы предложено дополнительно тестировать несколькими сериями наборов реагентов (обязательно 2 и более) различных фирм-производителей. Например, для выявления anti-HСV IgG используются иммунологические наборы реагентов, которые могут определить антитела к четырем белковым компонентам (антигенам) вирусного гепатита С (NS3, NS4, NS5 и сore). Исследование считается наиболее высоко специфичным.

Для первичного выявления антител в лабораториях могут использоваться скрининговые тестовые системы или иммуноферментный метод (ИФА). Его суть: возможность зафиксировать и количественно определить специфическую реакцию антиген+антитело при участии особых меченых ферментных систем.

В роли подтверждающего метода хорошо помогает иммуноблоттинг. Он сочетает ИФА с электрофорезом. Одновременно позволяет дифференцировать антитела и иммуноглобулины. Положительными считаются пробы при обнаружении антител к двум и более антигенам.

Кроме выявления антител, в диагностике эффективно используют метод полимеразной цепной реакции, который позволяет зарегистрировать мельчайшее количество генного материала РНК, а также определение массивности вирусной нагрузки.

Как расшифровать результаты анализов?

По результатам исследований необходимо выявить одну из фаз гепатита.

• При латентном течении — нельзя обнаружить никаких маркеров антител.
• В острую фазу — возбудитель появляется в крови, наличие инфицирования можно подтвердить маркерами по антителам (IgM, IgG, суммарному показателю) и РНК.
• При переходе в фазу восстановления — в крови остаются антитела к иммуноглобулинам IgG.

Полную расшифровку развернутого исследования на антитела может сделать только врач специалист. В норме у здорового человека никаких антител к вирусу гепатита нет. Бывают случаи, когда при отрицательной пробе на антитела у пациента выявляется вирусная нагрузка. Такой результат нельзя сразу перевести в разряд ошибок лаборатории.

Оценка развернутых исследований

Приводим первичную (грубую) оценку анализов на антитела в сочетании с наличием РНК (генного материала). Окончательный диагноз ставится с учетом полного биохимического обследования функций печени. При остром вирусном гепатите С — в крови имеются антитела к IgM и core IgG, положительный генный тест, нет антител к неструктурированным белкам (NS).

Хронический гепатит С с высокой активностью сопровождается — наличием всех видов антител (IgM, core IgG, NS) и положительным тестом на РНК вируса. Хронический гепатит С в латентной фазе показывает — антитела к типу core и NS, отсутствие к IgM, негативное значение теста на РНК.

В период выздоровления — длительно удерживаются положительные тесты на иммуноглобулины типа G, возможно некоторое повышение фракций NS, другие тесты будут отрицательными. Специалисты придают значение выяснению соотношения между антителами к IgM и IgG.

Так, в острую фазу коэффициент IgM/IgG составляет 3–4 (количественно антитела IgM преобладают, что указывает на высокую активность воспаления). В процессе лечения и приближения выздоровления коэффициент становится в 1,5–2 раза меньше. Так подтверждается падение активности вируса.

Кого необходимо обследовать на антитела в первую очередь?

В первую очередь опасности заражения подвергаются определенные контингенты людей, кроме пациентов с клиническими признаками гепатита неясной этиологии. Чтобы раньше выявить заболевание и начать лечение вирусного гепатита С, необходимо проводить обследование на антитела:

• беременных;
• доноров крови и органов;
• людей, которым переливалась кровь и ее компоненты;
• детей, рожденных от инфицированных матерей;
• персонал станций переливания крови, отделений по заготовке, переработке, хранению донорской крови и препаратов из ее компонентов;
• медицинских работников отделений гемодиализа, трансплантации, хирургии любого профиля, гематологии, лабораторий, стационарных отделений хирургического профиля, процедурных и прививочных кабинетов, стоматологических клиник, станций скорой помощи;
• всех больных с заболеваниями печени;
• пациентов центров гемодиализа, перенесших пересадку органов, хирургическое вмешательство;
• пациенты наркологических клиник, противотуберкулезных и кожно-венерологических диспансеров;
• сотрудников домов ребенка, спец. интернатов, детских домов, школ-интернатов;
• контактных лиц в очагах вирусного гепатита.

Своевременно пройти обследование на антитела и маркеры — меньшее, что можно сделать для профилактики. Ведь недаром гепатит С именуется «ласковым убийцей». Ежегодно из-за вируса гепатита С на планете умирает около 400 тыс. человек. В основном причина — осложнения заболевания (цирроз, рак печени).

Анти-HCV – анализ на гепатит С, назначаемый врачом в процессе диагностики вирусной инфекции. Тест основан на особенностях ответа иммунной системы человека при попадании патогена внутрь клеток. При этом происходит выброс в кровь биологически активных веществ – иммуноглобулинов (в медицинской литературе обычно обозначаются сокращенно Ig).

Вырабатывающиеся антитела (АТ) специфичны, то есть их структура четко предопределена в зависимости от разновидности патогена. На этом и построен принцип серологического иммуноферментного исследования, которое получило название анализ ИФА анти-HCV.

Строение и содержание синтезирующихся иммуноглобулинов находится в прямой зависимости от структурных единиц вириона гепатита С. HCV (hepatitis C virus) представляет собой патоген округлой формы, диаметр не превышает 50 нм. В середине располагается одна нить РНК, покрытая капсидом (core-протеином). Снаружи его окружает оболочка, основу строения которой составляют липиды, а вкрапления гликопротеинов Е1 и Е2 имеют вид выступов.

Структуру генома вируса можно представить в виде схемы:

Современный анализ HCV основан на выявлении нескольких маркеров инфекции. Это РНК вируса, core-антиген и специфические антитела. Раньше других в сыворотке крови определяется именно РНК ВГС (вирусного гепатита С). Второй по времени показатель – core-антиген. Его можно обнаружить через неделю после появления РНК в количестве достаточном, для идентификации тест-системами.

Чувствительность анализа на антиген вируса гепатита С зависит от механизма проведения исследования. При хемилюминесцентной детекции она значительно выше (до 0,06 пг/мл), чем при классической иммуноферментной реакции при помощи окисления хромогена пероксидазой. Но чем выше чувствительность анализа, тем дороже система для тестирования.

Уровень РНК вируса в крови тесно связан с концентрацией core-антигена. Так, некоторые методики позволяют определить приблизительную вирусную нагрузку с учетом коэффициента корреляции.

Специфические антитела к вирусу гепатита С определяются при помощи скрининговых иммуноферментных и иммуноблоттинговых тест-систем. Последние отличаются более высокой специфичностью.

Ориентировочный срок появления РНК вируса, антигена и различных типов иммуноглобулинов приведен в таблице:

Маркеры	Сроки выявления в крови при помощи стандартных анализов
HCV RNA	1–2 неделя
Core-Ag	3 неделя
Anti-HCV IgM	4–7 неделя
Anti-core IgG и Anti-NS3 IgG	5–8 неделя
Anti-NS4A|B IgG и Anti-NS5A IgG	6–9 неделя
Anti-HCV IgG	Начиная с 9 недели

Большинство применяемых в настоящее время тест-систем были разработаны еще в начале 1990-х годов. При необходимости диагностировать вирус используются антигены, полученные по образцам изолятов 1990-х, соответствующих HCV генотипа 1а. Уже есть информация об отсутствии у некоторых пациентов АТ к core-антигену – одному из самых иммуногенных антигенов ВГС. Это связывают с появлением определенных мутаций. Поэтому, чтобы исключить сомнительные результаты, следует обращаться в лаборатории, работающие с современными тест-системами (производства Abbott, Bayer и др.).

Анти-HCV: что это за анализ?

Существует несколько типов диагностических тестов на гепатит С, которые выполняются при помощи серологической иммуноферментной реакции.

Каждый из них дает специалисту определенную информацию. Это:

• предполагаемое наличие заболевания;
• форма течения вирусной инфекции;
• срок с момента инфицирования;
• реакция иммунной системы на проникновение патогена в кровоток;
• состояние пациента после приема медикаментов либо по итогам самостоятельного выздоровления после острой фазы заболевания.

Описание анализа на суммарные антитела

Исследование начинают с теста Anti-HCV Total, предназначенного для определения суммарных антител (IgG + IgM). Проведение других анализов целесообразно в том случае, если анти HCV положительный: что это значит, может определить только врач. Дело в том, что у некоторых пациентов отмечают ложноположительный результат, что требует дополнительного обследования.

Исследование на антитела к основным структурным белкам HCV

Наиболее показателен анализ крови на core-Ag. Иммуноглобулины к этой структурной субъединице появляются раньше других и служат специфическим лабораторным маркером инфицирования. Но вместе с тем, если АТ не обнаружены, это не исключает заражения. Отрицательный результат может быть обусловлен либо мутацией самого HCV, либо индивидуальными особенностями пациента.

Дальнейший скрининг на гепатит С включает анализ крови анти-HCV на определение спектра различных типов иммуноглобулинов. Так, обнаружение антител класса IgM свидетельствует об остром течении инфекции, анти – HCV IgG говорит в пользу длительной, хронической или латентной формы вирусного заболевания. Но расшифровку результатов должен проводить специалист, который объяснит, что это за анализ, и даст рекомендации по дальнейшему обследованию и лечению.

Точность

Точность иммуноферментного исследования зависит от производителя диагностических тест-систем. Не последнюю роль играет и профессионализм медицинского персонала. Специфичность и достоверность подобного исследования достигает 90%. Поэтому положительный анализ на гепатит С, проведенный серологическим методом, однозначно служит показанием для дальнейшей диагностики.

Но перед тем как сдавать кровь на HbsAg HCV или другие ИФА, необходимо поинтересоваться, на каком оборудовании будет проводиться анализ. При появлении каких-либо вопросов, лучше обратиться к врачу. Качество выполненного исследования полностью определяет тактику проведения дальнейшей диагностики.

Методика проведения анализа на гепатит С

Иммуноферментный анализ на гепатит С относят к серологическим методам исследования.

Тест-системы, при помощи которых выполняется ИФА, делят на несколько групп в зависимости от применяемых типов антител:

• лизатные, в ходе исследования применяют нативные АТ, полученные из культуры;
• рекомбинантные, используют синтезированные при помощи генной инженерии белковые структуры, аналогичные по строению с исследуемым антигеном;
• пептидные, применяют искусственно синтезированные пептиды.

В качестве твердой фазы обычно используют 96-луночные планшеты, реже – полистироловые шарики. Катализируют ИФА ряд специфических биологически активных ферментов.

Проведение иммуноферментного анализа проводится в несколько этапов:

1. Происходит распознавание исследуемого образца антителом. Результат определяют по количеству образовавшихся иммунных комплексов или остаткам свободных мест специфического связывания.
2. Формирование меченного ферментами соединения.
3. Трансформация ферментной метки в определенный сигнал, который регистрируется при помощи какого-либо физико-химического метода (спектрофотометрия, флуориметрия, люминесценция и т.д.).

Существуют такие типы иммуноферментного анализа, выполняемого для диагностики вирусного гепатита С:

• «сэндвич»-метод;
• непрямой ИФА;
• конкурентный метод ИФА;
• ингибирующий ИФА;
• прямой ИФА.

Предварительно пациенту необходимо взять направление от врача. В частной лаборатории сдать анализ можно и без соответствующих документов. Непосредственно перед исследованием медсестра регистрирует данные больного и соответствующим образом маркирует пробирки.

Забор крови осуществляется из вены. Предварительно кожу обрабатывают стерильной салфеткой с дезинфицирующим раствором. После процедуры рану заклеивают одноразовым пластырем. Сроки постановки иммуноферментной реакции составляют от 1 до 5 дней. Результат можно забрать либо непосредственно в лаборатории, либо получить в электронном виде на почту или по коду на сайте.

Показания для ИФА

Обратиться к врачу, а впоследствии и сдать кровь на суммарные антитела к гепатиту С необходимо при возникновении специфических признаков инфекции.

Заподозрить патологию можно по следующим симптомам:

• почти не проходящее чувство усталости;
• нарушения сна (обычно в ночное время суток человек мучается от бессонницы, а в дневное – от сонливости);
• снижение концентрации внимания, замедление остроты умственной деятельности;
• снижение аппетита;
• неприятное чувство распирания, тяжести и дискомфорта в правом подреберье;
• нарушения пищеварения, сопровождающиеся метеоризмом, расстройствами стула, изжогой, отрыжкой, неприятным привкусом во рту;
• желтизна (часто, незначительная и быстро проходящая) кожного покрова, белков глаз.

Но более чем у половины инфицированных вирусная инфекция протекает без выраженной клинической картины, а возникающие признаки легко спутать с ОРВИ или банальным переутомлением. Именно поэтому гепатит С часто выявляют непреднамеренно в ходе подготовки к диспансеризации.

Строгими показаниями к сдаче крови для анализа служат:

• характерные для нарушения функции печени симптомы;
• общее недомогание;
• отклонения от нормы при расшифровке результатов печеночных проб;
• контакт с человеком, у которого подтвержден диагноз гепатита С (половой акт, соприкосновение с кровью или слизистыми и т.д.);
• наличие ВИЧ;
• гемотрансфузия или пересадка органов, выполненная до 1992 года;
• регулярное прохождение процедуры гемодиализа;
• заболевания, требующие частых инвазивных медицинских манипуляций;
• у детей, рожденных от инфицированных HCV матерей;
• оформление медицинской книжки для военнослужащих, работников в сфере торговли, здравоохранения, образования, косметологии, фармации.

Обязательным является проведение ИФА при беременности. Исследование выполняют на 12 и 30 неделе.

Не стоит забывать о таком понятии, как «серологическое окно». Под этим термином подразумевает срок, прошедший с момента инфицирования до времени, когда выявляется вирус, а точнее – вырабатываемые к его антигенам антитела.

Повторное проведение ИФА назначают при:

• неопределенных результатах первого анализа;
• прохождении противовирусной терапии (для контроля титра антител);
• Anti-HCV Total отрицательном, но сохранении симптомов вирусного гепатита.

По мнению специалистов, риску заражения подвергается практически каждый посетитель стоматологического или косметологического кабинета. Поэтому с целью профилактики Анти ВГС Тотал (определение суммарных антител методом ИФА) рекомендуют сдавать ежегодно.

Как подготовиться

Достоверность полученных результатов анализа во многом зависит от правильной подготовки пациента. Рекомендации специалистов включают:

• не есть за 12–14 часов до сдачи крови;
• за 3–4 часа до анализа отказаться от курения;
• сдают кровь в первой половине дня;
• после пробуждения нельзя ничего пить кроме негазированной воды;
• за 3–4 дня до исследования исключить жирную пищу, жареные блюда, приготовленные с большим количеством масла, «тяжелые» соусы (майонез, тартар и т.д., особенно покупные), фастфуд (включая снеки и закуски), колбасные изделия, копчености, сушеную, вяленую рыбу и/или мясо, в целом меню перед анализом должно составляться по диете №5;
• за 7–10 дней до ИФА категорически противопоказаны спиртные напитки (вне зависимости от крепости).

В целом перед сдачей крови необходимо придерживаться принципов рационального правильного питания, по возможности отказаться от вредных привычек.

При обращении к врачу с результатами анализа необходимо сообщить обо всех принимаемых медикаментах, возможных нарушений правил подготовки к исследованию, сопутствующих заболеваниях. Также следует рассказать о беспокоящих симптомах, даже если, на первый взгляд, они не имеют отношения к поражению печени.

Расшифровка полученных результатов

Расшифровка Anti HCV должна проводиться профильным специалистом (инфекционистом или гепатологом). В норме антител к гепатиту С в организме человека не должно быть.

Однако ложноотрицательный результат возможен при:

• периоде «серологического окна»;
• сопутствующем иммунодефиците (при вирусном поражении иммунитета выработка АТ прекращается);
• онкологических поражениях системы кроветворения.

Ложноположительный результат ИФА HCV AgAt иногда отмечают при:

• беременности (из-за выработки специфических белковых соединений, схожих по структуре с иммуноглобулинами);
• аутоиммунных патологиях (при таких заболеваниях продукция антител носит непредсказуемый характер);
• нарушениях системы кроветворения;
• выздоровлении после фазы острого гепатита С (у некоторых людей вирус уничтожается иммунной системой без медикаментозной терапии);
• предшествующей противовирусной терапии (иммуноглобулины могут сохраняться до 3–5 лет и более);
• у ребенка до 3 лет при рождении после беременности у инфицированной или прошедшей лечение матери;
• сопутствующих тяжелых инфекциях (вне зависимости от их этиологии), в таком случае ошибочные результаты возможны из-за массивного выброса антител в ответ на вирусное или бактериальное поражение тканей.

Расшифровку результатов иммуноферментного анализа можно представить в виде таблицы:

Начиная с 9 недели	Результат и описание возможной патологии
Определение суммарных антител (Anti-HCV Total analiz)

• проведение ИФА на IgG и IgM;
• выполнение качественной ПЦР.

Отрицательный означает, что человек здоров. Но подтверждающими анализами для исключения инфекции служит ПЦР (качественное определение РНК вируса) или повторное ИФА через 4–8 недель.

ИФА Core-Ag Положительный результат свидетельствует о недавнем инфицировании Anti-HCV IgM Позитивный тест возможен при остром гепатите С. Если одновременно выявлены IgG вероятно обострение хронически протекающего вирусного процесса IgG (к различным структурным белкам) Обнаружение говорит в пользу хронического HCV

При обнаружении иммуноглобулинов в бланке с результатами анализов в обязательном порядке указывается их титр (концентрация). Таким образом врач может судить об интенсивности патологического процесса и оценить иммунный ответ. Но точную информацию о количественном содержании вируса в организме человека может дать только выявление РНК методом полимеразной цепной реакции.